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肾缺血再灌注(Renal Ischemiareperfusion,RIR)模型
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肾缺血再灌注(Renal Ischemiareperfusion,RIR)模型

肾缺血再灌注(RIR)损伤是由各种原因导致的肾脏灌注不足所致,伴随着一系列连贯的细胞事件发生,包括活性氧释放、凋亡、坏死、炎症细胞的浸润和活性介质的释放,从而导致组织损伤,常见于各种类型的休克、急性肾动脉阻断或肾脏移植等临床治疗过程,是临床上导致急性肾损伤AKI(Acute Kidney Injury)的最常见原因
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1 实验动物

SPF级BALB/c小鼠,健康雄性,周龄:6-8周龄,体重:20g-22g

2 实验周期  

2-3个工作日

3 建模方法

⑴实验材料

眼科剪1个(直/尖头/10.5cm)、微动脉夹1个(4cm弯全齿)、眼科镊1个(弯/1mm宽/10cm)有齿镊1个(1.88mm宽/12cm)、持针器1个(1.55mm宽/12cm)、7-0缝合线1个(金环)、无菌纱布、无菌棉签、酒精棉、小鼠操作台

⑵小鼠麻醉方法及术前准备

2%三溴乙醇(赛默飞),25 ml/kg腹腔注射麻醉小鼠剃毛备皮酒精消毒,术前禁食12h,自由饮水。

 

⑶实验方法

①小鼠侧卧脾脏下开口(此处脂肪较多)。

②弯镊掏出肾脏,贴着肾蒂夹出避免直接夹肾脏,微动脉夹夹闭肾蒂,肾脏变灰白为成功缺血(缺血40分钟再灌注)。

③每5分钟湿棉签浸润肾脏表面一次。

④轻柔取下微动脉夹,观察肾脏恢复供血,回纳肾脏。

⑥缝合创口并消毒。

4 注意事项

⑴侧卧脾脏下开口;

⑵弯镊掏出肾脏时轻柔小心避免损伤肾脏;

⑶肾脏表面保持湿润;

⑷夹闭肾蒂肾脏变灰白为成功缺血。

5 模型评价

⑴ 血清生化指标检测:

取各时间点(0h、1h、3h、6h、12h、24h、72h)血清,检测血清BUN(尿素氮)和Scr(血肌酐)水平,评估肾功能。

⑵ 肾系数检测:

摘取双侧肾脏后,生理盐水冲洗,称重计算肾系数。

肾系数=双侧肾重(mg)/体重(g)

⑶ 肾小管坏死的评分:

每张切片×200倍镜下取外髓质部10个视野。

0 = 正常;

1 = 轻微损伤(受损肾小管< 5%);

2 = 轻度损伤(受损肾小管 5 %~25 %);

3 = 中度损伤(受损肾小管 25 %~75 %);

4 = 重度损伤(受损肾小管> 75 %) 。

⑷ 标志因子水平

ELISA法检测血清TNF-α、IL-6 含量,模型小鼠血清 TNF- α和 IL- 6 含量在各时间点均显著高于对照组,其中24h为最显著。

6 模型应用

可用于研究肾缺血再灌注损伤在临床预防和治疗中的作用。

7 补充说明

本实验是以BALB/C小鼠为基础制备的模型,若需要其他动物模型需要跟我司联系确定详细报价。

关键词:
肾脏
小鼠
1个
实验
血清
检测
模型
方法
缺血
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