盲肠结扎穿孔术（Cecum Ligation And Puncture,CLP）脓毒血症模型

脓毒血症是指由感染性因素引起的全身炎症反应综合征，严重者可导致器官功能障碍或循环障碍等，是严重创伤、烧伤、休克、感染和外科大手术等常见的并发症，病死率较高。

产品描述

1 实验动物

SPF级BALB/c小鼠，健康雌/雄均可，周龄：不限，体重：21g-25g

动物适应性饲养3-5天,实验前禁食12h。

2 实验周期

2个工作日

3 建模方法

⑴实验材料

眼科剪1个（直/尖头/10.5cm）、有齿镊1个（1.88mm宽/12cm）、眼科镊1个（直/1mm宽/10cm）、眼科镊1个（弯/1mm宽/10cm）、持针器1个（1.55mm宽/12cm）、5-0缝合线（金环）、21G针头、无菌纱布、无菌棉签、酒精棉、小鼠操作台、剃毛器

⑵小鼠麻醉方法及术前准备

2％三溴乙醇（赛默飞），25 ml/kg腹腔注射麻醉小鼠剃毛备皮碘伏消毒酒精脱碘，饲养3-5天,实验前禁食12h。

⑶实验方法

①动物仰卧固定于操作台上,沿正中打开腹腔长约2cm，寻找盲肠，小心分离其远端与大肠肠系膜。

②盲肠远端1/2处用5-0缝合线紧紧结扎，并用21G针头在已结扎盲肠远端中央处贯通穿刺，轻轻挤出少量肠内容物，尽量避免损伤血管。（更换手套）

③将盲肠回纳入腹腔，用缝线连续缝合肌肉层结节缝合皮肤并碘伏消毒，皮下注射生理盐水0.05ml/g抗休克，将模型鼠置于加热垫维持肛温在37±0.5℃。

④模型鼠苏醒后自由饮水，正常饲养。

4 注意事项

⑴盲肠结扎位置是CLP模型中死亡率和疾病严重程度的最主要决定因素，可通过改变盲肠结扎位置和穿刺针直径来调节脓毒症的严重程度，结扎盲肠的长度增加，促炎细胞因子的水平也在增加；

⑵使用不同型号的针头，小鼠7d死亡率也不同，18G为100%，21G为 50%，25G为5%，脓毒症的严重程度随穿刺针头直径增加而加重（18G针头直径最大）；

⑶手术完成后要及时对动物进行保温和补液，以减少死亡率。

5 模型评价

⑴ 模型状态

每个指标分成5个等级（0-4分）

动物出现发热，心率、呼吸频率明显加快，口鼻腔分泌物增多，精神萎靡，嗜睡，蜷缩，竖毛，少动，拒食或少食，眼角出现分泌物，血培养阳性等为模型成功，至少一个器官功能障碍为严重脓毒症成模标准。

①外观：        

            0-光泽，光滑；

            1-部分毛发竖毛；

            2-背部全部毛发竖毛；

            3-蓬松凌乱；

            4-焦粹。

②自主意识：   

            0-活跃；

            1-活跃，不直立；

            2-活动减少迟缓，仍然行走；

            3-挑后才活动，行动缓慢；

            4-挑动后仍静止不动。

③自主活动：    

            0-活动数量正常（摄食，饮水，攀爬，行走，打斗等）；

            1-活动减少，只在笼底活动；

            2-活动显著减少，静止，偶尔探索活动；

            3-静止不动；

            4-静止不动，颤抖（特别是后肢）。

④对刺激的反应:

            0-迅速反应；

            1-对声音无反应或者反应慢，对触碰反应强烈（马上逃离）；

            2-对声音无反应，对触碰反应一般（走几步）；

            3-对声音无反应，对触碰反应弱（不移动）；

            4-对声音无反应，对触碰反应几乎无应，推倒后不能翻身。

⑤眼睛：        

            0-全开；

            1-没有全开，可能有分泌；

            2-半闭，可能有分泌；

            3-没有全闭，可能有分泌；

            4-闭合或者显著分泌物（浑浊）。

⑥呼吸频率：    

           0-正常；

          1-轻微减少（肉眼无法计数）；

          2-中度减少（肉眼勉强能计数）；

          3-显著减少（肉眼能轻松计数，呼吸间隔0.5s）；

          4-极度减少（呼吸间隔＞1s）。

⑦呼吸质量：   

          0-正常；

          1-间断性呼吸困难；

          2-呼吸困难，不喘气；

          3-呼吸困难，间断性喘气；

          4-喘气。

⑵血标本检测

①C-反应蛋白(C-Reactive Protein，CRP)：CRP是一种能与肺炎球菌细胞壁中的C－多糖结合的急性时相反应蛋白，对于脓毒症的早期诊断及预后评估有重要价值；

②血清降钙素原（PCT）：可作为早期鉴别全身感染及判断脓毒血症严重程度及预后的有效指标；

③炎症因子：血浆中炎症因子增加是脓毒症的典型特征之一，IL-1β、TNF-α及IL-6是主要的促炎症细胞因子，在脓毒症模型后显著升高。

 6 模型应用

脓毒血症模型的建立有助于人们更好地探讨脓毒症的发病机制和寻找有效的治疗措施，获得更早的诊断并采取干预措施，从而改善脓毒症患者的预后。

7 补充说明

本实验是以BALB/c小鼠为基础制备的模型，若需要其他动物模型需要跟我司联系确定详细报价。