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胆管结扎纤维化模型(Bile Duct Ligation,BDL)
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胆管结扎纤维化模型(Bile Duct Ligation,BDL)

胆管结扎造成肝外胆道梗阻,从而引起胆管扩张和胆汁淤积。当胆道内压力进一步增高,肝内胆小管扩张破裂,肝内血管受扩张胆管和胆汁外渗的双重压迫,肝细胞发生缺血和坏死,纤维组织大量增生,包围肝小叶并散布于肝细胞周围,最终可引起肝硬化。
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产品描述

实验动物

SPF级C57小鼠,健康,体重为20g以上,6-8周龄。

实验周期

实验周期18-21个工作日。

建模方法

(1)麻醉消毒,会阴上1cm处切开皮肤、延腹中线切开肌肉向上开口至剑突上0.5-1cm

(2)放入腹腔开器撑开创口,取2支无菌棉签生理盐水润湿后探入腹腔,将肝叶上翻至隔区十二指肠推至下腹部充分暴露肝门,找到总胆管

  

(3)眼科弯镊和眼科无齿镊依次钝性分离胆管埋置2条6.0手术缝线并分别结扎后准备关腹

 

(4)使用6.0可吸收缝合线连续缝合肌肉层,结节缝合皮肤,留0.3cm线头

   

(5)碘伏棉球消毒切口1-2次防止继发感染。

模型的评价

(1)大体观察:小鼠术后3天体重普遍下降2-4g,术后2周个别小鼠(约20%)出现消瘦弓背现象;小鼠术后即体表出现黄疸现象,包括耳朵、尾巴和皮肤;小鼠术后尿液发黄,变得偏浓稠。肝脏大体标本BDL组小鼠肝脏明显肿大,肝包膜紧张、边缘钝、棕黄色,质稍硬。

 

(2)血清学检测:麻醉小鼠,眼球取血,室温静置2h后于4℃ 3000r离心10分钟提取血清,进行血清学指标( AST、ALT、ALP、TBIL、DBIL和TBA) 检测,反应肝脏功能的主要指标明显上升。

(3)病理组织学检测:统一取肝左叶组织1.5 cm×1 cm× 0.2 cm于4%多聚甲醛溶液中固定24 h后脱水,包埋,进行石蜡切片后行HE染色,天狼猩红染色。HE染色可见汇管区小胆管明显增生,小胆管周围纤维组织增生, 大量胶原沉积在小胆管周围;天狼猩红可见肝小叶中央静脉周围有大量的胶原纤维束。

模型应用

胆管结扎(BDL)适应用于肝脏纤维化相关机制研究;肝脏纤维化相关药物筛选和疗效评价

检测服务

(1) 血清学检测:ALT、AST、HA、ALB、TBA、TBIL、DBIL

(2) 病理组织学检测:HE染色、MASSON染色、天狼猩红染色

(3) mRNA水平检测:Real-time PCR

(4) 蛋白水平检测:Western blot

(5) 菌群分析

(6) 代谢小分子分析

补充说明

本实验是以小鼠为基础制备的模型,若需要其他动物模型需要跟我司联系确定详细报价。

关键词:
结扎
胆管
检测
小鼠
染色
肝脏
实验
术后
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