兽医服务
提供屏障/隔离环境大小鼠寄养、保种和实验服务,提供禽、兔、豚鼠和猪狗猴
等大动物寄养和实验服务;可开展病理、毒理、药效、安评等技术服务。
遗传修饰动物基因型检测
检测周期
检测周期2-3个工作日。
实验步骤
(1)小鼠组织取材
无菌收取小鼠尾尖组织,如图1所示。
图1 小鼠尾尖组织取材
(2)小鼠DNA提取
将鼠尾置于盛有220μl裂解液的EP管中,56℃孵育过夜。次日,采用膜吸附法从供试品中提取基因组DNA。使用TE将基因组DNA稀释至50 ~ 400 ng/ μl, 作为PCR扩增模板,-20℃保存备用。
(3)特异性片段扩增
采用两对特异性引物,对鼠尾基因组DNA进行扩增。野生型小鼠DNA作为阴性对照,无菌水作为空白对照。
(4)梯度凝胶电泳
采用1.5%琼脂糖凝胶,150V,25 min,对扩增片段进行电泳,两对引物均能扩增出特异性扩增片段的样品判定为阳性。
(5)图像采集
梯度凝胶电泳后,转至凝胶成像系统采集图像。如图2所示。
图2 PCR结果
M:D2000 Marker;野生型: 560 bp;纯合子:415 bp;杂合子:415 & 560 bp
(6)数据分析和报告整理
根据图像采集结果分析检测结果,整理出检测报告,如图3所示。
图3 检测报告
补充说明
1、需客户提供引物或引物序列(由我司代为合成)
2、检测结束后我们将提供剩余的DNA样品及引物
3、提供一份检测报告及原始条带的荧光或灰度图
4、组织特异性敲除小鼠,将针对其特异性病理变化进行检测。
我们是一家以研发和提供高品质实验动物为基础,以生物制品开发、疾病模型创制、药物与医疗器械临床前评价及临床兽医人才培训为主业的高新技术企业。
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