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遗传修饰动物基因型检测
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遗传修饰动物基因型检测

改变目标基因(Genotype),可能会导致小鼠某些生理过程的变化(Phenotype),从而推断目标基因的功能。明确目标基因发生改变的过程叫Genotyping(基因型鉴定)。对于基因工程小鼠模型来说,就是区分野生型和突变型。发现并评估小鼠生理变化的过程叫Phenotyping(表型分析)。
所属分类
基因型鉴定
80.0
市场价
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产品编号
V100100
数量:
-
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1
产品描述

检测周期

检测周期2-3个工作日。

实验步骤

(1)小鼠组织取材

        无菌收取小鼠尾尖组织,如图1所示。

       

 

图1 小鼠尾尖组织取材

(2)小鼠DNA提取

         将鼠尾置于盛有220μl裂解液的EP管中,56℃孵育过夜。次日,采用膜吸附法从供试品中提取基因组DNA。使用TE将基因组DNA稀释至50 ~ 400 ng/ μl, 作为PCR扩增模板,-20℃保存备用。

(3)特异性片段扩增

         采用两对特异性引物,对鼠尾基因组DNA进行扩增。野生型小鼠DNA作为阴性对照,无菌水作为空白对照。

(4)梯度凝胶电泳

         采用1.5%琼脂糖凝胶,150V,25 min,对扩增片段进行电泳,两对引物均能扩增出特异性扩增片段的样品判定为阳性。

(5)图像采集

         梯度凝胶电泳后,转至凝胶成像系统采集图像。如图2所示。

 

图2 PCR结果

 

M:D2000 Marker;野生型:  560 bp;纯合子:415 bp;杂合子:415 & 560 bp

(6)数据分析和报告整理

        根据图像采集结果分析检测结果,整理出检测报告,如图3所示。

 

  

图3 检测报告

补充说明

1、需客户提供引物或引物序列(由我司代为合成)

2、检测结束后我们将提供剩余的DNA样品及引物

3、提供一份检测报告及原始条带的荧光或灰度图

4、组织特异性敲除小鼠,将针对其特异性病理变化进行检测。

 

关键词:
基因型
检测
dna
扩增
小鼠
特异性
引物
报告
组织
基因组
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